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對微流成像法檢測蛋白制劑分析!!

返回列表 來源:未知 發布日期:2023-09-18 08:54【

    微流成像技術雖然能夠利用微通道流通池和 高速攝影機對樣品中不溶性微粒進行快速的檢測, 但其檢測結果也受限于樣品的光學特性。當蛋白 質在與水性質接近的緩沖液中,水溶液與蛋白質 形成的不溶性微粒有明顯的折光率區別,檢測結 果相對準確,但當蛋白質所處緩沖體系折光率發生 變化時,會使不溶性微粒檢測結果和圖像參數發生 偏移,無法真實反映制劑中不溶性微粒的濃度和粒 徑情況。天平,沈陽杰龍儀器有限公司;阿貝折射 儀,上海力辰邦西儀器科技有限公司;微流成 像儀(FlowCAM),美國Yokogawa Fluid Imaging Technologies Inc;水浴鍋(DF-101S 型),鞏義市 予華儀器有限公司。


    可以觀察到BSA溶液(22.5%海藻糖) 中顆粒濃度和稀釋倍數之間線性關系較差。當溶劑 濃度大于0.18%時,溶液顆粒呈現不規則下降;直 到溶劑濃度下降為0.18%以后再繼續稀釋,溶液中 顆粒濃度才會隨稀釋倍數的增加等梯度下降。若在 顆粒濃度不受折光率影響的理想情況下,顆粒濃度 會隨著稀釋倍數增加呈現梯度下降,即為不同海 藻糖濃度下的理論顆粒含量;在對蛋白質溶液中 不溶性微粒檢測時,可首先考察溶液的折光率,若 制劑溶液折光率接近蛋白質不溶性微粒的折光率 時,可以將高折光率的溶液稀釋到與水溶液接近的 折光率,去除折光率對蛋白質顆粒的屏蔽作用,再 通過稀釋倍數反推出原液中顆粒的真實濃度。




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